91精品婷婷国产综合久久蝌蚪-91精品推荐-www欧美视频-www欧美在线-国产11页-国产123-国产乡下妇女三片-国产乡下妇女做爰-精品视频一区二区在线观看-精品视频在线播放-欧美精品www-欧美精品xx-麻豆传媒在线-麻豆传媒在线播放-日本黄网免费-日本黄网站

細胞制備流程及轉化方法
1. 轉移0.2-1ml培養物至裝有500ml LB(或其他營養豐富的培養基)的1-2升搖瓶

2. 37°C下劇烈振蕩培養2-6小時

3. 定時監控OD600值(培養1小時后每半小時測定一次)

4。 當OD600值達到0.5-1.0時，從搖床中取出搖瓶，置于冰上冷卻至少15分鐘(需要的話這種方式可以存放培養液數小時)

5. 細胞在4°C 5000g下離心15分鐘，棄上清液(如需要，沉淀可在4°C的10%甘油中保存一兩天)

6. 用滅菌的冰水重懸浮細胞。先用渦旋儀或吸液管重懸浮細胞于少量體積中(幾毫升)，然后加水稀釋至離心管的2/3體積。

7. 照上面步驟重復離心，小心棄去上清液

8. 照上面步驟用滅菌的冰水重懸浮細胞

9. 離心，棄上清液

10. 用20ml滅菌的、冰冷后的10%甘油重懸浮細胞

11. 照上面步驟離心，小心棄去上清液(沉淀可能會很松散)

12. 用10%甘油重懸浮細胞至zui終體積為2-3ml

13. 將細胞按150μl等份裝入微量離心管，于-80°C保存